纳米抗体与小型蛋白支架文献周报

检索日期： 2026-09-09覆盖时间：2026/09/03 – 2026/09/08检索数据库：PubMed纳入标准：

1. 期刊属于 JCR Q1 或 Q2（通过 ISSN/eISSN 在 2025 年高质量杂志参考目录中精确匹配核验）；
2. 文献核心研究对象为 nanobody/VHH、FN3/monobody、affibody、DARPin、anticalin、knottin 或其他非传统抗体类小型蛋白结合支架；
3. 涉及支架的筛选、设计、工程化改造、亲和力成熟、稳定性优化、结构解析、诊断、成像、药物递送、肿瘤治疗、免疫治疗、感染、神经疾病、靶向降解、CAR 设计、双/多特异分子等应用方向。排除标准：
4. 传统 monoclonal antibody / IgG / Fab / scFv 为主线的文章；
5. 仅在引言或背景中提到 nanobody 或 protein scaffold，但无实际实验或设计；
6. 纯综述、社论、新闻、观点文章（除非发表于高质量期刊且对方向判断很重要）；
7. 只研究抗体检测方法但不涉及 nanobody/VHH 或小型蛋白支架；
8. 无法核验 PMID、DOI、摘要或期刊分区的文献；
9. "protein scaffold" 指酶催化骨架而非结合支架的文章（如天然产物 biosynthesis、光合系统蛋白架构）。

本周检索结果概览：

• PubMed 初检返回 16 条记录（主检索式 16 条 + 辅检索式 16 条，去重后 16 条）；
• 经支架聚焦过滤后 14 条（排除 2 条非支架聚焦文献）；
• 经 ISSN/eISSN 期刊分区核验：Q1/Q2 高质量文献 12 篇，分区未核验 2 篇；
• 经人工复核排除 2 篇"protein scaffold"语义不符的文献（JACS 天然产物 biosynthesis、ACS Nano 光合系统蛋白架构，其"protein scaffold"指酶折叠骨架而非结合支架）；
• 最终纳入高质量文献 10 篇（A 级 2 篇，B 级 7 篇，C 级 1 篇），待核验 2 篇，排除 4 篇。

一、本周高质量文献列表

二、逐篇文献解读

文献 1

英文题目： Antigen-Detected NMR for Minimal Epitope Engineering and Structure-Guided Selection of a NaV1.7-Selective Nanobody.

中文题目： 抗原检测 NMR 技术用于最小表位工程化和 NaV1.7 选择性纳米抗体的结构引导筛选

作者： Liu Junyu, Chen Wanlin, Cristofori-Armstrong Ben, Crawford Theo, Chen Kai-En, Xie Peng, Chan Rainbow Wing Bo, Zhu Yifei, Golder Mimi, Pereira Schmidt Anneka, Naughton Jennifer D, Condon Nicholas D, Andersson Åsa, Dehkhoda Farhad, McMahon Kirsten L, Klasfauseweh Tabea, Thapa Ashvriya, Tran Hue, Tran Poanna, Jami Sina, Ragnarsson Lotten, Furness Sebastian G B, Deuis Jennifer R, Collins Brett M, Tham Wai-Hong, Prasadam Indira, Vetter Irina, Mobli Mehdi

期刊： Advanced Science (Weinheim, Baden-Wurttemberg, Germany)

发表时间： 2026（ahead of print, 2026-09-07 PubMed 入库）

PMID： 42702812

DOI： 10.1002/advs.77611

PubMed 链接： https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/42702812/

期刊分区： Q1；JIF 14.1；JIF rank 33/460

分区核验来源： 数据来自 2025 年（2024JIF），ISSN 2198-3844 精确匹配高质量杂志参考目录

OA 状态： 非OA（有 PMC ID PMC13547701，但 PMC OA API 返回非 OA 状态）

全文链接： 无

支架类型：nanobody/VHH

靶点：NaV1.7（人电压门控钠通道 1.7）

应用方向：诊断/成像、筛选平台/方法、工程化/设计、结构解析

1. 原文摘要

Selective molecular recognition of membrane proteins is challenging because they contain few solvent-exposed extracellular epitopes, which often depend on their native environment for structure, making them difficult to isolate faithfully for binder discovery. Here, we show that antigen-detected NMR is well suited both to characterizing the folding of engineered minimal epitopes from the human voltage-gated sodium channel NaV1.7 and to selecting binders that recognize their solvent-exposed surfaces. Isotope labelling of the antigen enables NMR resonance assignment to assess retained local secondary structure, while 15N titration and zz-exchange mapping provide binding and interface information. Combined with AlphaFold2 complex prediction, this creates a practical method for screening and ranking candidate binders. The approach was further validated by a high-resolution x-ray structure of an antigen-nanobody complex. Applying this workflow identified R4C8, a subtype- and species-selective nanobody whose binding to the extracellular surface of human NaV1.7 is supported by zz-exchange mapping, modelling, and cellular recognition, and which has minimal effects on channel gating. R4C8 detected NaV1.7 in engineered cell lines and in primary osteoarthritis-derived chondrocytes, providing a useful tool for selective target detection. These results show how antigen-detected NMR can support peptide engineering and structure-guided protein binder selection against minimal epitopes.

2. 摘要中文翻译

膜蛋白的选择性分子识别极具挑战性，因为它们仅有少量溶剂暴露的胞外表位，且这些表位通常依赖于其天然环境来维持结构，使得难以忠实分离用于结合体（binder）发现。本研究展示，抗原检测 NMR（antigen-detected NMR）非常适合用于表征人电压门控钠通道 NaV1.7 的工程化最小表位的折叠，并筛选能识别其溶剂暴露表面的结合体。抗原的同位素标记使 NMR 共振指派成为可能，从而评估保留的局部二级结构；同时 15N 滴定和 zz-exchange mapping 提供结合和界面信息。结合 AlphaFold2 复合物预测，这构成了一种筛选和排序候选结合体的实用方法。该方法进一步通过抗原-nanobody 复合物的高分辨率 X 射线晶体结构得到验证。应用此工作流鉴定出 R4C8——一种亚型和物种选择性的 nanobody，其与人 NaV1.7 胞外表面的结合得到了 zz-exchange mapping、建模和细胞识别的支持，且对通道门控影响极小。R4C8 可在工程化细胞系和原代骨关节炎来源软骨细胞中检测 NaV1.7，提供了选择性靶标检测的有用工具。这些结果表明，抗原检测 NMR 如何支持肽段工程化和针对最小表位的结构引导蛋白结合体筛选。

3. 摘要层面解读

• 研究对象：人电压门控钠通道 NaV1.7 的工程化最小表位及其 nanobody 结合体
• 使用的蛋白支架类型：nanobody/VHH（R4C8）
• 靶点或应用场景：NaV1.7 靶向检测；膜蛋白表位工程化；疼痛与软骨疾病相关的钠通道工具开发
• 主要方法：抗原检测 NMR（同位素标记 + 15N 滴定 + zz-exchange mapping）+ AlphaFold2 复合物预测 + X 射线晶体学验证
• 主要发现：鉴定出 R4C8 nanobody，具有亚型和物种选择性，对通道门控影响极小，可在工程化细胞和原代软骨细胞中检测内源性 NaV1.7
• 与传统抗体/scFv 相比的潜在优势：NMR 方法可直接在液相中评估结合界面，无需晶体筛选即可获得结构信息；nanobody 尺寸小，可识别膜蛋白表面较小表位
• 该文献为什么值得关注：将 NMR 结构生物学与 AlphaFold2 预测和 X 射线验证结合，形成了一条从表位工程化到结合体筛选的完整工作流，对膜蛋白 nanobody 开发具有方法论参考价值

4. 全文精读分析

未进行全文分析，原因：非 OA / 无法合法访问全文。

5. 一句话评价

将抗原检测 NMR 与 AlphaFold2 和 X 射线晶体学整合，实现了膜蛋白 NaV1.7 最小表位的工程化与选择性 nanobody R4C8 的结构引导筛选，是膜蛋白结合体发现方法学的重要进展。

文献 2

英文题目： Near-Infrared Fluorescence Imaging and Photothermal Therapy of Tumors Using a Targeted Helical Protein Scaffold.

中文题目： 使用靶向螺旋蛋白支架的近红外荧光成像和肿瘤光热治疗

作者： Carrillo-Malani Nicole, Ho Gabrielle, Liang Qiushi, Miller Joann, Busch Theresa M, Amirshaghaghi Ahmad, Cheng Zhiliang, Tsourkas Andrew

期刊： ACS Applied Bio Materials

发表时间： 2026（已正式发表, pages 8137-8149, PubMed 2026-08-08 入库）

PMID： 42569871

DOI： 10.1021/acsabm.6c00903

PubMed 链接： https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/42569871/

期刊分区： Q2；JIF 4.7；JIF rank 58/147

分区核验来源： 数据来自 2025 年（2024JIF），ISSN 2576-6422 精确匹配高质量杂志参考目录

OA 状态： 非OA（有 PMC ID PMC13454980，但 PMC OA API 返回非 OA 状态）

全文链接： 无

支架类型：affibody

靶点：HER2

应用方向：肿瘤治疗、诊断/成像、药物递送

1. 原文摘要

Photothermal therapy (PTT) using near-infrared (NIR) photoactive agents offers a minimally invasive approach for tumor ablation; however, many existing platforms rely on polymeric or nanoparticle carriers that limit targeting precision and control over dye loading. Here, we report the design of a modular eight-helix protein scaffold containing 20 cysteine residues that enables covalent, site-specific conjugation of the NIR dye AQuora800-maleimide. The protein scaffold is expressed with different HER2-targeting ligands, and in vitro screening identifies an affibody dimer-based construct (AD-20AQ) as the most effective platform for targeted fluorescent imaging and therapy. In vivo pharmacokinetic imaging studies in a 4T1 murine tumor model reveal enhanced tumor accumulation of AD-20AQ compared to a monolabeled affibody dimer (AD-1AQ), with sustained retention in HER2-positive tumors. Furthermore, PTT of HER2 tumors with an 808 nm laser, following intravenous administration of AD-20AQ, leads to complete tumor ablation. Collectively, these results establish targeted, labeled protein scaffolds as a versatile platform for NIR fluorescence imaging and photothermal therapy.

2. 摘要中文翻译

使用近红外（NIR）光活性剂的光热治疗（PTT）提供了一种微创的肿瘤消融方法；然而，许多现有平台依赖聚合物或纳米颗粒载体，限制了靶向精度和染料负载控制。本研究报道了一种模块化八螺旋蛋白支架的设计，含有 20 个半胱氨酸残基，可实现近红外染料 AQuora800-maleimide 的共价位点特异性偶联。该蛋白支架表达时携带不同的 HER2 靶向配体，体外筛选鉴定出基于 affibody 二聚体的构建体（AD-20AQ）作为靶向荧光成像和治疗最有效的平台。在 4T1 小鼠肿瘤模型的体内药代动力学成像研究中，AD-20AQ 相比单标记 affibody 二聚体（AD-1AQ）显示出增强的肿瘤蓄积，并在 HER2 阳性肿瘤中持续滞留。此外，静脉注射 AD-20AQ 后用 808 nm 激光对 HER2 肿瘤进行光热治疗，可实现完全肿瘤消融。总体而言，这些结果确立了靶向标记蛋白支架作为近红外荧光成像和光热治疗的通用平台。

3. 摘要层面解读

• 研究对象：HER2 靶向的近红外荧光成像和光热治疗平台
• 使用的蛋白支架类型：affibody（affibody 二聚体 AD-20AQ）
• 靶点或应用场景：HER2 阳性肿瘤的诊断成像与光热消融
• 主要方法：模块化八螺旋蛋白支架（20 个 Cys 位点）+ AQuora800-maleimide 位点特异性偶联 + 4T1 小鼠肿瘤模型体内成像与光热治疗
• 主要发现：AD-20AQ（affibody 二聚体 + 20 个染料分子）在 HER2 阳性肿瘤中蓄积显著优于单染料版本，808 nm 激光照射后实现完全肿瘤消融
• 与传统抗体/scFv 相比的潜在优势：蛋白支架尺寸远小于抗体，组织穿透性更好；可精确控制染料偶联数量和位置；模块化设计允许多配体筛选
• 该文献为什么值得关注：将 affibody 靶向与高密度近红外染料负载结合，实现了诊疗一体化（theranostic），为蛋白支架在光热治疗中的应用提供了概念验证

4. 全文精读分析

未进行全文分析，原因：非 OA / 无法合法访问全文。

5. 一句话评价

基于 affibody 二聚体的多 Cys 蛋白支架实现 20 个近红外染料精确偶联，在 HER2 阳性肿瘤中实现荧光成像引导的完全光热消融，是蛋白支架诊疗一体化的重要应用。

文献 3

英文题目： Antigen-binding-enhanced divalent nanobody-based immunomagnetic separation coupled with ATP bioluminescence for viable Salmonella detection.

中文题目： 基于抗原结合增强型二价纳米抗体的免疫磁分离耦联 ATP 生物发光用于活沙门氏菌检测

作者： Ma Yu, Kong Weiying, Xu Jiale, Wang Haibo, Mo Zimei, Wang Jia

期刊： Analytical and Bioanalytical Chemistry

发表时间： 2026（ahead of print, 2026-09-08 PubMed 入库）

PMID： 42709182

DOI： 10.1007/s00216-026-06808-4

PubMed 链接： https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/42709182/

期刊分区： Q1；JIF 3.8；JIF rank 21/86

分区核验来源： 数据来自 2025 年（2024JIF），ISSN 1618-2650 精确匹配高质量杂志参考目录

OA 状态： 非OA（无 PMC ID）

全文链接： 无

支架类型：nanobody/VHH

靶点：沙门氏菌（Salmonella）表面抗原

应用方向：诊断/成像、感染性疾病、工程化/设计

1. 原文摘要

Current Salmonella detection methods are time-consuming or incapable of effectively discriminating viable bacteria from dead cells, restricting their practical applications in food safety monitoring. Thus, in this study, an antigen-binding-enhanced Salmonella divalent nanobody (diVHH) was optimally expressed and chemically conjugated with magnetic beads (MBs). Combined with ATP bioluminescence, a novel strategy was developed for the rapid detection of viable Salmonella. Optimization of prokaryotic expression significantly improved the diVHH yield, with an approximately 2.96-fold enhancement. Then, the diVHH-functionalized MBs achieved capture efficiencies exceeding 90% for multiple tested Salmonella serotypes. By integrating immunomagnetic separation with ATP bioluminescence, the established assay exhibited a linear detection range from 10² to 10⁶ CFU/mL, with a limit of detection of 10 CFU/mL for S. Enteritidis and 12 CFU/mL for S. Typhimurium. The entire detection procedure could be completed within 2 h. In spiked food samples, the method achieved favorable recovery rates of 96.00-106.89% with low coefficients of variation (0.78-7.54%). Notably, this method could be successfully applied to the semi-quantitative analysis of multiple Salmonella serotypes in environmental and food samples, and the obtained results were highly consistent with plate counting results. This study demonstrates that engineered diVHHs exhibit enhanced antigen-binding capacity and can serve as excellent recognition reagents for selective Salmonella detection to enable a reliable and rapid assay for viable Salmonella with promising application potential.

2. 摘要中文翻译

当前沙门氏菌检测方法耗时或无法有效区分活菌与死菌，限制了其在食品安全监测中的实际应用。本研究中，一种抗原结合增强型沙门氏菌二价 nanobody（diVHH）经优化表达后与磁珠（MBs）化学偶联。结合 ATP 生物发光，开发了一种用于活沙门氏菌快速检测的新策略。原核表达优化显著提高了 diVHH 产量，提升约 2.96 倍。diVHH 功能化磁珠对多种测试的沙门氏菌血清型实现了超过 90% 的捕获效率。通过将免疫磁分离与 ATP 生物发光整合，所建方法的线性检测范围为 10² 至 10⁶ CFU/mL，对肠炎沙门氏菌（S. Enteritidis）的检测限为 10 CFU/mL，对鼠伤寒沙门氏菌（S. Typhimurium）为 12 CFU/mL。整个检测流程可在 2 小时内完成。在加标食品样品中，该方法的回收率为 96.00-106.89%，变异系数低（0.78-7.54%）。值得注意的是，该方法可成功应用于环境和食品样品中多种沙门氏菌血清型的半定量分析，且获得的结果与平板计数结果高度一致。本研究表明，工程化 diVHH 展示了增强的抗原结合能力，可作为选择性沙门氏菌检测的优良识别试剂，实现可靠快速的活沙门氏菌检测，具有广阔的应用前景。

3. 摘要层面解读

• 研究对象：沙门氏菌快速检测方法（二价 nanobody + 免疫磁分离 + ATP 生物发光）
• 使用的蛋白支架类型：nanobody/VHH（二价 diVHH）
• 靶点或应用场景：沙门氏菌表面抗原；食品安全与环境监测
• 主要方法：原核表达优化 diVHH + 磁珠化学偶联 + ATP 生物发光检测
• 主要发现：diVHH 产量提升 2.96 倍；多血清型捕获率 >90%；检测限 10-12 CFU/mL；2 小时完成全流程；加标食品回收率 96-107%
• 与传统抗体/scFv 相比的潜在优势：二价 diVHH 比单价 VHH 结合更强；nanobody 热稳定性好、原核表达成本低；化学偶联磁珠灵活性高
• 该文献为什么值得关注：将工程化 diVHH 与 ATP 生物发光结合，解决了活菌 vs 死菌区分的难题，具有直接转化价值

4. 全文精读分析

未进行全文分析，原因：非 OA / 无法合法访问全文。

5. 一句话评价

工程化二价 diVHH 结合免疫磁分离与 ATP 生物发光，实现 2 小时内 10 CFU/mL 灵敏度的活沙门氏菌检测，是 nanobody 在食品安全诊断中的实用转化范例。

文献 4

英文题目： Biodistribution and radiation dosimetry of the PDGFRβ targeting PET tracer [⁶⁸Ga]Ga-ATH001.

中文题目： 靶向 PDGFRβ 的 PET 示踪剂 [⁶⁸Ga]Ga-ATH001 的生物分布和辐射剂量学

作者： Lubberink Mark, Lohith Talakad G, Derdak Zoltan, Wilkens Paul, Palmér Emilia, Ramolli Alexandra, Ferrat Mélodie, Tran Thuy A, Mitran Bogdan, Abouyzayed Ayman, Johansson Lars, Wennbo Haakan, Rorsman Fredrik, Vessby Johan, Eriksson Olof

期刊： European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging

发表时间： 2026（ahead of print, 2026-09-08 PubMed 入库）

PMID： 42709070

DOI： 10.1007/s00259-026-08167-9

PubMed 链接： https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/42709070/

期刊分区： Q1；JIF 7.6；JIF rank 10/212

分区核验来源： 数据来自 2025 年（2024JIF），ISSN 1619-7089 精确匹配高质量杂志参考目录

OA 状态： 非OA（无 PMC ID）

全文链接： 无

支架类型：affibody

靶点：PDGFRβ（血小板源性生长因子受体 β）

应用方向：诊断/成像、放射性配体治疗

1. 原文摘要

PURPOSE: [68Ga]Ga-ATH001 is an Affibody molecule targeting PDGFRβ in development as a Positron Emission Tomography (PET) tracer for non-invasive imaging of active fibrosis. Here we present first-in-human [68Ga]Ga-ATH001 biodistribution and radiation dosimetry data. METHODS: Radiation dosimetry of [68Ga]Ga-ATH001 was evaluated in healthy participants (n = 3) and participants with metabolic dysfunction-associated steatohepatitis (MASH) (n = 3). Each participant was intravenously administered ~2.5 MBq/kg [68Ga]Ga-ATH001 and imaged by whole-body PET for up to 3 h post-injection. Absorbed dose coefficients and effective doses according to ICRP 103 were calculated using IDAC DOSE 2.1. RESULTS: The effective dose of [68Ga]Ga-ATH001 was 0.028 ± 0.002 mSv/MBq with kidneys as the dose-limiting organ. Administration of a target dose of 2 MBq/kg would result in a sex-averaged effective dose of 4.1 mSv. Subjects tolerated the tracer administration well. CONCLUSION: [68Ga]Ga-ATH001 demonstrates a dosimetry and safety profile that supports further clinical development as a repeatable, non-invasive PET marker of active fibrosis in tissue.

2. 摘要中文翻译

目的： [⁶⁸Ga]Ga-ATH001 是一种靶向 PDGFRβ 的 Affibody 分子，正在开发作为活性纤维化无创成像的正电子发射断层扫描（PET）示踪剂。本文报告 [⁶⁸Ga]Ga-ATH001 的首次人体生物分布和辐射剂量学数据。方法：在健康参与者（n = 3）和代谢功能障碍相关脂肪性肝炎（MASH）参与者（n = 3）中评估 [⁶⁸Ga]Ga-ATH001 的辐射剂量学。每位参与者静脉注射约 2.5 MBq/kg [⁶⁸Ga]Ga-ATH001，注射后全身 PET 成像最长 3 小时。使用 IDAC DOSE 2.1 根据 ICRP 103 计算吸收剂量系数和有效剂量。结果：[⁶⁸Ga]Ga-ATH001 的有效剂量为 0.028 ± 0.002 mSv/MBq，肾脏为剂量限制器官。给予 2 MBq/kg 目标剂量将导致性别平均有效剂量为 4.1 mSv。受试者对示踪剂注射耐受良好。结论：[⁶⁸Ga]Ga-ATH001 的剂量学和安全性特征支持其作为可重复的活性组织纤维化无创 PET 标志物的进一步临床开发。

3. 摘要层面解读

• 研究对象：靶向 PDGFRβ 的 Affibody PET 示踪剂首次人体剂量学研究
• 使用的蛋白支架类型：affibody
• 靶点或应用场景：PDGFRβ；活性纤维化无创成像（MASH/脂肪肝纤维化）
• 主要方法：⁶⁸Ga 标记 Affibody 分子 + 全身 PET 成像 + IDAC DOSE 2.1 剂量计算
• 主要发现：有效剂量 0.028 mSv/MBq，肾脏为限制器官；2 MBq/kg 目标剂量对应 4.1 mSv 有效剂量；安全耐受良好
• 与传统抗体/scFv 相比的潜在优势：Affibody 分子量小（~6.5 kDa），血液清除快，适合 ⁶⁸Ga 短半衰期核素标记；可重复注射成像
• 该文献为什么值得关注：这是 Affibody 在纤维化 PET 成像方向的首次人体研究，展示了 Affibody 分子在临床转化的实质性进展

4. 全文精读分析

未进行全文分析，原因：非 OA / 无法合法访问全文。

5. 一句话评价

Affibody 分子 [⁶⁸Ga]Ga-ATH001 首次人体研究确认其作为 PDGFRβ 靶向 PET 纤维化示踪剂的安全性和剂量学特征，支持进一步临床开发。

文献 5

英文题目： ADAMTS13 fusion constructs with dual activity against VWF: a novel strategy for iTTP.

中文题目： 具有抗 VWF 双重活性的 ADAMTS13 融合构建体：iTTP 的新策略

作者： Xue Yunpeng, Roest Mark, Humphreys Steven J, van der Vorm Lisa N, Konings Joke, Meijer Piet, Whyte Claire S, de Groot Philip G, Arce Nicholas A, Li Renhao, Mutch Nicola J, de Laat Bas, Huskens Dana

期刊： Journal of Thrombosis and Haemostasis : JTH

发表时间： 2026（ahead of print, 2026-09-07 PubMed 入库）

PMID： 42705544

DOI： 10.1016/j.jtha.2026.09.002

PubMed 链接： https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/42705544/

期刊分区： Q1；JIF 5.0；JIF rank 14/98

分区核验来源： 数据来自 2025 年（2024JIF），ISSN 1538-7836 精确匹配高质量杂志参考目录

OA 状态： 非OA（无 PMC ID）

全文链接： 无

支架类型：nanobody/VHH

靶点：VWF（血管性血友病因子）A1 结构域

应用方向：治疗应用、工程化/设计

1. 原文摘要

BACKGROUND: Immune thrombotic thrombocytopenic purpura (iTTP) is a life-threatening thrombotic microangiopathy. iTTP pathophysiology is based on severe ADAMTS13 deficiency caused by autoantibodies, leading to accumulation of ultra-large von Willebrand factor (VWF) multimers and microvascular thrombosis. Engineered ADAMTS13 variants reduce autoantibody binding. But some display impaired VWF-cleaving activity, whereas others such as glycan engineered variants maintain proteolytic function. OBJECTIVES: To investigate a single-domain antibody (aVWF sdAb) targeting the A1 domain of VWF in an active conformation and two dual-action fusion constructs (MDTCS-aVWF and MDTCSm-aVWF) linking this sdAb with either a truncated ADAMTS13 (MDTCS) or an autoantibody-resistant mutant (MDTCSm). METHODS: Binding of aVWF to active VWF and the VWF A1 domain was assessed using ELISA-based assays. Proteolytic activity was tested using FRETS-VWF73, VWF multimer and beads-on-a-string assays. VWF-platelet interactions were measured by light transmission aggregometry and flow cytometry. Autoantibody resistance was evaluated using FRETS-VWF73 assays in the presence of plasma from iTTP patients. RESULTS: The aVWF sdAb selectively bound active VWF and inhibited platelet-VWF interaction in solution, without impairing platelet adhesion to collagen-bound VWF. Both MDTCS-aVWF and MDTCSm-aVWF retained high proteolytic activity against VWF and reduced platelet-VWF interactions. Notably, MDTCSm-aVWF demonstrated enhanced proteolytic activity and superior resistance to iTTP autoantibodies. CONCLUSION: Fusion construct MDTCSm-aVWF, combining an enzymatically active, autoantibody-resistant ADAMTS13 variant with a VWF conformation-specific inhibitory sdAb, offers a novel alternative therapeutic approach for iTTP.

2. 摘要中文翻译

背景： 免疫性血栓性血小板减少性紫癜（iTTP）是一种危及生命的血栓性微血管病。iTTP 病理生理学基于自身抗体导致的严重 ADAMTS13 缺乏，引起超大血管性血友病因子（VWF）多聚体蓄积和微血管血栓形成。工程化 ADAMTS13 变体可减少自身抗体结合。但部分变体表现出 VWF 裂解活性受损，而其他变体如糖基工程化变体则保持蛋白水解功能。目的：研究靶向 VWF A1 结构域活性构象的单域抗体（aVWF sdAb）以及将该 sdAb 与截短型 ADAMTS13（MDTCS）或抗自身抗体突变体（MDTCSm）连接的两种双作用融合构建体（MDTCS-aVWF 和 MDTCSm-aVWF）。方法：使用 ELISA 法评估 aVWF 与活性 VWF 及 VWF A1 结构域的结合。使用 FRETS-VWF73、VWF 多聚体和 beads-on-a-string 试验测试蛋白水解活性。通过光透射比浊法和流式细胞术测量 VWF-血小板相互作用。在 iTTP 患者血浆存在下使用 FRETS-VWF73 试验评估抗自身抗体能力。结果：aVWF sdAb 选择性结合活性 VWF 并抑制溶液中的血小板-VWF 相互作用，而不损害血小板对胶原结合 VWF 的粘附。MDTCS-aVWF 和 MDTCSm-aVWF 均保持对 VWF 的高蛋白水解活性并减少血小板-VWF 相互作用。值得注意的是，MDTCSm-aVWF 表现出增强的蛋白水解活性和对 iTTP 自身抗体的优越抗性。结论：融合构建体 MDTCSm-aVWF 将具有酶活性的抗自身抗体 ADAMTS13 变体与 VWF 构象特异性抑制 sdAb 结合，为 iTTP 提供了一种新的替代治疗方法。

3. 摘要层面解读

• 研究对象：iTTP 双重作用治疗策略——ADAMTS13 变体与 VWF 构象特异性 sdAb 融合
• 使用的蛋白支架类型：nanobody/VHH（aVWF sdAb = single-domain antibody）
• 靶点或应用场景：VWF A1 结构域（活性构象）；iTTP 治疗的替代策略
• 主要方法：ELISA 结合测定 + FRETS-VWF73 蛋白水解 + beads-on-a-string + 光透射比浊法 + iTTP 患者血浆抗自身抗体测试
• 主要发现：MDTCSm-aVWF 融合体同时具有 VWF 裂解活性和 sdAb 介导的血小板-VWF 抑制，且对 iTTP 自身抗体具有优越抗性
• 与传统抗体/scFv 相比的潜在优势：sdAb 尺寸小、稳定性高、可融合酶活性域形成双功能分子；传统抗体无法同时实现酶活性和构象特异性抑制
• 该文献为什么值得关注：展示了 nanobody/sdAb 作为融合伙伴构建双功能治疗分子的创新策略，将酶替代与构象特异性抑制合二为一

4. 全文精读分析

未进行全文分析，原因：非 OA / 无法合法访问全文。

5. 一句话评价

将抗自身抗体的 ADAMTS13 突变体与 VWF 构象特异性 sdAb 融合，构建了双重活性治疗分子 MDTCSm-aVWF，为 iTTP 治疗提供了创新的双功能 nanobody 融合策略。

文献 6

英文题目： Structural basis for modulation of group III mGlu receptors by transsynaptic interactions.

中文题目： 跨突触相互作用调节 III 型代谢型谷氨酸受体的结构基础

作者： Ludlam William G, Chang Chu-Ting, Cechova Kristina, Liauw Brandon W, Cho Hwa-Jin, Salar Safoura, Sawh-Gopal Anjelique, Parvin Afroza, Dhaliwal Simrat K, Dhaliwal Simran K, Izard Tina, Bao Huan, Brown Anne M, Dunn Henry A, Vafabakhsh Reza, Martemyanov Kirill A

期刊： Science Advances

发表时间： 2026（已正式发表, pages eaed3793, PubMed 2026-09-04 入库）

PMID： 42696580

DOI： 10.1126/sciadv.aed3793

PubMed 链接： https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/42696580/

期刊分区： Q1；JIF 12.5；JIF rank 12/135

分区核验来源： 数据来自 2025 年（2024JIF），ISSN 2375-2548 精确匹配高质量杂志参考目录

OA 状态： 非OA（有 PMC ID PMC13544217，但 PMC OA API 返回非 OA 状态）

全文链接： 无

支架类型：FN3/monobody（ELFN 蛋白含 FN3 结构域）

靶点：III 型代谢型谷氨酸受体（mGluR4/6/7/8）

应用方向：神经疾病、结构解析

1. 原文摘要

Group III metabotropic glutamate receptors (mGluRs) are critical signaling molecules that regulate strength, homeostasis, and plasticity of glutamatergic synaptic signaling. These receptors are engaged in transsynaptic interactions with extracellular leucine-rich repeat and fibronectin type III domain-containing (ELFN) cell adhesion proteins. ELFN proteins have been shown to play a critical role in regulation of activity and localization of mGluRs activity in vivo, yet the exact nature of their regulatory interaction has remained unknown. Here, we present a cryo-electron microscopy structure of the ELFN-mGluR complex. We identify a specific ELFN-binding pocket on mGluRs involved in its allosteric regulation through the network of residues affecting the orthosteric ligand binding site. We further uncover cooperativity whereby mGluR activation increases their association with ELFN proteins as a potential feedback mechanism to regulate synaptic strength. Last, we determine that disruption in mGluR-ELFN interaction is a recurring mechanism underlying several neurological conditions as we delineate their structure-functional etiology.

2. 摘要中文翻译

III 型代谢型谷氨酸受体（mGluRs）是调节谷氨酸能突触信号强度、稳态和可塑性的关键信号分子。这些受体与胞外富含亮氨酸重复序列和纤连蛋白 III 型结构域（ELFN）细胞粘附蛋白发生跨突触相互作用。ELFN 蛋白已被证明在体内调节 mGluRs 活性和定位中发挥关键作用，但其调节相互作用的确切性质仍不清楚。本文报道了 ELFN-mGluR 复合物的冷冻电镜结构。我们在 mGluRs 上鉴定了一个特定的 ELFN 结合口袋，该口袋通过影响正构配体结合位点的残基网络参与其别构调节。我们进一步发现了一种协同性，即 mGluR 激活增加其与 ELFN 蛋白的结合，作为调节突触强度的潜在反馈机制。最后，我们确定 mGluR-ELFN 相互作用的破坏是多种神经疾病的反复出现的机制，并阐明了其结构-功能病因学。

3. 摘要层面解读

• 研究对象：III 型代谢型谷氨酸受体与 ELFN 蛋白的跨突触相互作用
• 使用的蛋白支架类型：FN3 结构域（ELFN 蛋白天然含 FN3 结构域，非工程化 monobody/adnectin，但涉及 FN3 结构域的结构生物学）
• 靶点或应用场景：mGluR4/6/7/8；神经疾病（突触功能障碍相关）
• 主要方法：冷冻电镜（cryo-EM）结构解析 + 别构调节位点鉴定 + 功能-结构病因学分析
• 主要发现：鉴定了 mGluR 上 ELFN 结合口袋，该口袋通过别构网络调节正构配体结合位点；mGluR 激活增强 ELFN 结合（正反馈）；mGluR-ELFN 相互作用破坏与多种神经疾病相关
• 与传统抗体/scFv 相比的潜在优势：不适用（此研究涉及天然 FN3 结构域的跨突触相互作用，非工程化结合体）
• 该文献为什么值得关注：虽然不是工程化 FN3/monobody 研究，但揭示了 FN3 结构域在天然突触信号中的别构调节机制，对理解 FN3 折叠的结构-功能关系以及设计针对 mGluR 的 FN3 衍生结合体有参考价值

4. 全文精读分析

未进行全文分析，原因：非 OA / 无法合法访问全文。

5. 一句话评价

冷冻电镜揭示 ELFN 蛋白 FN3 结构域与 III 型 mGluR 的跨突触别构调节机制，为 FN3 结构域在天然突触信号中的功能及 mGluR 相关神经疾病提供了结构基础。

文献 7

英文题目： Palladium-triggered bioorthogonal phenylalanine decaging.

中文题目： 钯触发的生物正交苯丙氨酸脱笼

作者： Zhu Yuchao, Liu Shibo, Qin Shan, Wang Xin, Liu Yuan, Zhang Xianrui, Shan Ye, Fan Xinyuan, Chen Peng R

期刊： Nature Chemistry

发表时间： 2026（ahead of print, 2026-09-03 PubMed 入库）

PMID： 42686833

DOI： 10.1038/s41557-026-02226-2

PubMed 链接： https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/42686833/

期刊分区： Q1；JIF 20.2；JIF rank 10/239

分区核验来源： 数据来自 2025 年（2024JIF），ISSN 1755-4349 精确匹配高质量杂志参考目录

OA 状态： 非OA（无 PMC ID）

全文链接： 无

支架类型：affibody

靶点：HER2

应用方向：肿瘤治疗、工程化/设计

1. 原文摘要

Phenylalanine (Phe) orchestrates protein interfacial hydrophobicity and π-driven interactions that are critical for diverse biological processes. Its nonpolar architecture, however, precludes traditional heteroatom-dependent reactions, leaving its functional manipulation in living systems unresolved. Here, by systematically evaluating exogenous heteroatom-based (X = O, N, B or I) caging groups under physiological conditions, we present a haloatom-assisted decaging strategy that uses iodine to cage Phe's side chain. This blockade can be tracelessly rescued through palladium-triggered bioorthogonal decaging. Through precise modulation, the haloatom-assisted decaging strategy enables: unmasking fluorophore activity, directing peptide disassembly, reactivating protein-protein interactions and rewiring cell-cell recognition. Using genetic code expansion, we site-specifically incorporated iodinated Phe into HER2-targeting affibodies for dynamic control of ligand-receptor interaction on the cell surface. Moreover, Phe decaging permits temporally controlled reshaping of antigenic peptide immunogenicity on tumour cells, thereby rewiring tumour-T cell engagement. We further optimized the decaging chemistry in cell lysates as well as inside living cells, which unlocks the possibility of chemically manipulating ubiquitous and functionally critical nonpolar groups in living systems.

2. 摘要中文翻译

苯丙氨酸（Phe）调控蛋白质界面的疏水性和 π 驱动的相互作用，这些相互作用对多种生物学过程至关重要。然而，其非极性架构排除了传统的杂原子依赖性反应，使其在活体系统中的功能操控未能解决。本研究通过在生理条件下系统评估外源杂原子（X = O、N、B 或 I）笼化基团，提出了一种卤素辅助脱笼策略，使用碘笼化 Phe 的侧链。这种阻断可通过钯触发的生物正交脱笼实现无痕恢复。通过精确调控，卤素辅助脱笼策略可实现：荧光团活性释放、多肽解组装导向、蛋白质-蛋白质相互作用重新激活和细胞间识别重编程。利用遗传密码扩展，我们将碘化 Phe 位点特异性地引入 HER2 靶向 affibody，实现细胞表面配体-受体相互作用的动态调控。此外，Phe 脱笼允许时间控制地重塑肿瘤细胞上抗原肽的免疫原性，从而重编程肿瘤-T 细胞相互作用。我们进一步在细胞裂解物和活细胞内优化了脱笼化学反应，为在活体系统中化学操控普遍存在且功能关键的非极性基团打开了大门。

3. 摘要层面解读

• 研究对象：钯触发的生物正交苯丙氨酸脱笼化学策略及其在 affibody 功能调控中的应用
• 使用的蛋白支架类型：affibody（HER2 靶向 affibody 作为应用载体）
• 靶点或应用场景：HER2 配体-受体相互作用动态调控；肿瘤-T 细胞相互作用重编程
• 主要方法：遗传密码扩展（非天然氨基酸掺入）+ 碘笼化 Phe + 钯触发生物正交脱笼
• 主要发现：碘笼化 Phe 可通过钯脱笼实现无痕恢复；在 affibody 中位点特异性引入碘化 Phe 实现对 HER2 结合的动态时空调控；脱笼可重塑肿瘤细胞免疫原性
• 与传统抗体/scFv 相比的潜在优势：affibody 尺寸小，适合遗传密码扩展和精确位点标记；化学调控可实现时间可控的配体-受体开关，传统抗体难以实现
• 该文献为什么值得关注：Nature Chemistry 顶刊；将 affibody 作为化学遗传学工具验证新型生物正交脱笼化学，展示了蛋白支架在化学生物学方法学创新中的应用

4. 全文精读分析

未进行全文分析，原因：非 OA / 无法合法访问全文。

5. 一句话评价

在 Nature Chemistry 发表的新型钯触发苯丙氨酸脱笼策略中，HER2 靶向 affibody 作为关键应用载体，实现了配体-受体相互作用的时空调控，展示了蛋白支架在化学生物学中的独特价值。

文献 8

英文题目： Functional mapping and engineering of the Sec translocon unlocked by a cell-free system.

中文题目： 无细胞系统解锁 Sec 易位子的功能图谱和工程化

作者： Meier Markus, Scholz Scott A, von Bank Leo, Levandoski João E, Lückhof Mosche, Schaaf Maximilian, Safronova Nataliya, Greenwood Nathan F, Si Shutian, Lieberwirth Ingo, Jung Anna Alena, Landfester Katharina, Driessen Arnold J M, Erb Tobias J

期刊： Science Advances

发表时间： 2026（已正式发表, pages eaej0987, PubMed 2026-09-03 入库）

PMID： 42685219

DOI： 10.1126/sciadv.aej0987

PubMed 链接： https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/42685219/

期刊分区： Q1；JIF 12.5；JIF rank 12/135

分区核验来源： 数据来自 2025 年（2024JIF），ISSN 2375-2548 精确匹配高质量杂志参考目录

OA 状态： 非OA（有 PMC ID PMC13537251，但 PMC OA API 返回非 OA 状态）

全文链接： 无

支架类型：nanobody/VHH

靶点：Sec 易位子（SecYEG）

应用方向：筛选平台/方法、工程化/设计、结构解析

1. 原文摘要

Almost all membrane proteins are inserted or translocated across membranes by the universally conserved Sec translocon. Despite its central role, experimental access to Sec function has remained limited. Here, we present ProSecCO (Protein Secretion in Cell-free via synthetic Operons), which is a cell-free protein synthesis platform that inserts SecYEG into synthetic vesicles, enabling direct testing of Sec in real-time and high-throughput, circumventing longstanding viability constraints. Screening 300 Sec variants in a single experiment, we consolidate three decades of Sec research, while vastly expanding mutant diversity for structure-function insights. Mapping over 30 functionally critical regions that modulate Sec activity across three orders of magnitude, we uncover dozens of super-active translocation variants and one variant of improved insertion activity. We further leverage ProSecCO to increase membrane protein quality and nanobody export, highlighting the potential of our system for advancing applications in synthetic biology and biotechnology.

2. 摘要中文翻译

几乎所有膜蛋白都通过普遍保守的 Sec 易位子插入或跨膜转运。尽管其核心地位，Sec 功能的实验通路一直有限。本文报道了 ProSecCO（通过合成操纵子的无细胞蛋白分泌），这是一个无细胞蛋白质合成平台，将 SecYEG 插入合成囊泡，实现高通量实时直接测试 Sec，绕过了长期存在的细胞活力约束。在单次实验中筛选 300 个 Sec 变体，我们整合了过去三十年的 Sec 研究，同时大幅扩展了突变多样性以获得结构-功能洞察。绘制了 30 多个在三个数量级上调节 Sec 活性的功能关键区域，发现了数十个超活性易位变体和一个改善插入活性的变体。我们进一步利用 ProSecCO 提高膜蛋白质量和 nanobody 分泌，突出了该系统在推进合成生物学和生物技术应用方面的潜力。

3. 摘要层面解读

• 研究对象：Sec 易位子的功能图谱和工程化（无细胞合成平台 ProSecCO）
• 使用的蛋白支架类型：nanobody/VHH（作为平台应用验证的下游产物）
• 靶点或应用场景：SecYEG 膜蛋白易位子；膜蛋白合成与 nanobody 分泌的生物技术应用
• 主要方法：无细胞蛋白质合成 + 合成囊泡 SecYEG 插入 + 300 变体高通量筛选
• 主要发现：绘制 30+ 功能关键区域；发现数十个超活性易位变体；ProSecCO 可提高膜蛋白质量和 nanobody 分泌效率
• 与传统抗体/scFv 相比的潜在优势：nanobody 作为无细胞系统的分泌产物验证了平台在生物技术中的应用潜力；无细胞系统绕过了活细胞膜蛋白表达的瓶颈
• 该文献为什么值得关注：无细胞平台为 Sec 易位子的功能研究和膜蛋白/nanobody 生产提供了新工具，对 nanobody 表达和分泌优化有直接参考价值

4. 全文精读分析

未进行全文分析，原因：非 OA / 无法合法访问全文。

5. 一句话评价

ProSecCO 无细胞平台实现了 300 个 Sec 变体的高通量筛选，并在膜蛋白合成和 nanobody 分泌中验证了生物技术潜力，为 nanobody 表达优化提供了新工具。

文献 9

英文题目： Simple and fast production of biologically active CXCL12/SDF-1 isoforms in E. coli using a Nanobody solubility partner.

中文题目： 使用 Nanobody 溶解性伙伴在大肠杆菌中简单快速生产生物活性 CXCL12/SDF-1 异构体

作者： Wittek Vanessa, Kaynert Jonas, Vicente Manuel M, Taft Manuel H, Garbers Christoph, Zocher Georg, Münster-Kühnel Anja K

期刊： Chemical Communications (Cambridge, England)

发表时间： 2026（已正式发表, pages 17170-17174, PubMed 2026-08-19 入库）

PMID： 42618284

DOI： 10.1039/d6cc03529a

PubMed 链接： https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/42618284/

期刊分区： Q2；JIF 4.2；JIF rank 84/239

分区核验来源： 数据来自 2025 年（2024JIF），ISSN 1364-548X 精确匹配高质量杂志参考目录

OA 状态： 非OA（无 PMC ID）

全文链接： 无

支架类型：nanobody/VHH

靶点：CXCL12/SDF-1（趋化因子）

应用方向：基础研究/其他

1. 原文摘要

CXCL12 is commonly produced by laborious inclusion-body refolding approaches. Here, we present a fast, scalable, and low-cost method for producing biologically active CXCL12/SDF-1 isoforms in E. coli within two days using a nanobody solubility partner, enabling simple and fast in-house production of the chemokines for multiple research applications.

2. 摘要中文翻译

CXCL12 通常通过繁琐的包涵体复性方法生产。本文报道了一种快速、可扩展、低成本的方法，使用 nanobody 溶解性伙伴在大肠杆菌中两天内生产生物活性的 CXCL12/SDF-1 异构体，实现了趋化因子的简单快速内部生产，可用于多种研究应用。

3. 摘要层面解读

• 研究对象：CXCL12/SDF-1 趋化因子异构体的可溶性表达方法
• 使用的蛋白支架类型：nanobody/VHH（作为溶解性融合伙伴）
• 靶点或应用场景：CXCL12/SDF-1 趋化因子；蛋白生产工具
• 主要方法：Nanobody 融合伙伴 + 大肠杆菌可溶性表达 + 两天内纯化
• 主要发现：使用 nanobody 作为溶解性伙伴，可在两天内获得生物活性的 CXCL12 异构体，避免了传统的包涵体复性
• 与传统抗体/scFv 相比的潜在优势：nanobody 作为融合伙伴比传统抗体的溶解性提升效果更好，且可被蛋白酶切除；表达成本低、速度快
• 该文献为什么值得关注：展示了 nanobody 作为非结合用途的溶解性伙伴的创新应用，为难表达蛋白的生产提供了实用工具

4. 全文精读分析

未进行全文分析，原因：非 OA / 无法合法访问全文。

5. 一句话评价

将 nanobody 作为溶解性融合伙伴，实现两天内大肠杆菌可溶性表达生物活性 CXCL12 趋化因子，是 nanobody 在蛋白生产工具中的创新应用。

文献 10

英文题目： Targeting angiogenesis: advances in the design and engineered applications of nanobodies.

中文题目： 靶向血管生成：纳米抗体的设计进展和工程化应用

作者： Liu Yuxuan, Li Zhaohai, Ma Yuanyuan, Liu Yulin

期刊： Frontiers in Immunology

发表时间： 2026（已正式发表, pages 1912560, PubMed 2026-09-06 入库）

PMID： 42698711

DOI： 10.3389/fimmu.2026.1912560

PubMed 链接： https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/42698711/

期刊分区： Q1；JIF 5.9；JIF rank 32/183

分区核验来源： 数据来自 2025 年（2024JIF），ISSN 1664-3224 精确匹配高质量杂志参考目录

OA 状态： 非OA（有 PMC ID PMC13542555，但 PMC OA API 返回非 OA 状态）

全文链接： 无

支架类型：nanobody/VHH

靶点：血管生成相关通路（VEGF/VEGFR 等）

应用方向：肿瘤治疗、诊断/成像、药物递送、CAR/细胞治疗、双/多特异、工程化/设计

1. 原文摘要

Angiogenesis is a fundamental physiological process; however, its pathological dysregulation drives diseases such as solid tumors, wet age-related macular degeneration, and rheumatoid arthritis. Although clinically effective, conventional anti-angiogenic monoclonal antibodies are limited by poor tissue penetration, off-target toxicities, and susceptibility to compensatory resistance. This review systematically examines the structural advantages and engineering strategies of nanobodies (Nbs) targeting angiogenesis-related pathways. Advanced engineering approaches, such as AI-assisted humanization and multivalent assembly, effectively mitigate immunogenicity and extend serum half-life. Furthermore, multispecific designs can simultaneously block compensatory pathways to circumvent resistance. Moreover, preclinical studies indicate that integrating these molecules into site-specific nanobody-drug conjugates and targeted delivery vehicles may improve therapeutic precision and local drug accumulation; however, their long-term safety, manufacturability, and clinical benefit remain to be established. Functionalizing Nbs with radionuclides or fluorophores may enable the development of novel theranostic platforms that support real-time molecular imaging and image-guided surgery. In parallel, nanobody-based CAR-T (Nb-CAR-T) cells facilitate the targeted remodeling of the disease microenvironment. Ultimately, this review highlights the value of engineered Nbs as a highly programmable and transformative platform. By overcoming key limitations of conventional antibodies, engineered nanobodies open new avenues for precise, multi-dimensional interventions in solid tumors. Their potential in certain non-neoplastic angiogenic diseases is emerging but requires further validation.

2. 摘要中文翻译

血管生成是一个基本的生理过程；然而，其病理性失调驱动了实体瘤、湿性年龄相关性黄斑变性和类风湿性关节炎等疾病。尽管传统抗血管生成单克隆抗体具有临床疗效，但存在组织穿透性差、脱靶毒性和易产生代偿性耐药等局限。本文系统综述了靶向血管生成相关通路的 nanobody（Nb）的结构优势和工程化策略。先进工程化方法（如 AI 辅助人源化和多价组装）有效降低免疫原性并延长血清半衰期。此外，多特异性设计可同时阻断代偿通路以克服耐药。临床前研究表明，将这些分子整合到位点特异性 nanobody-药物偶联物和靶向递送载体中可提高治疗精度和局部药物蓄积；然而，其长期安全性、可制造性和临床获益仍有待确立。用放射性核素或荧光团功能化 Nb 可实现新型诊疗一体化平台的开发，支持实时分子成像和图像引导手术。同时，基于 nanobody 的 CAR-T（Nb-CAR-T）细胞促进疾病微环境的靶向重塑。最终，本综述突出了工程化 Nb 作为高度可编程和变革性平台的价值。通过克服传统抗体的关键局限，工程化纳米抗体为实体瘤的精准多维干预开辟了新途径。其在某些非肿瘤性血管生成疾病中的潜力正在显现，但需要进一步验证。

3. 摘要层面解读

• 研究对象：靶向血管生成的 nanobody 工程化策略和应用综述
• 使用的蛋白支架类型：nanobody/VHH
• 靶点或应用场景：血管生成通路（VEGF/VEGFR 等）；实体瘤、湿性 AMD、类风湿性关节炎
• 主要方法：文献综述（AI 辅助人源化、多价组装、多特异设计、Nb-药物偶联、Nb-CAR-T 等）
• 主要发现：系统梳理了 nanobody 在抗血管生成领域的结构优势、工程化策略和临床前应用进展
• 与传统抗体/scFv 相比的潜在优势：nanobody 组织穿透性好、免疫原性低、可多价/多特异组装、可人源化延长半衰期、可作为 CAR-T 靶向域
• 该文献为什么值得关注：作为综述（发表类型标注 Review），系统梳理了 nanobody 在血管生成领域的全方位应用，对了解该领域全景和发展方向有参考价值；但作为纯综述、无原始实验数据，推荐等级为 C

4. 全文精读分析

未进行全文分析，原因：非 OA / 无法合法访问全文。

5. 一句话评价

系统综述了 nanobody 在抗血管生成领域从结构设计到诊疗一体化和 Nb-CAR-T 的全方位应用进展，为该方向提供了全景参考，但作为纯综述无原始实验数据。

三、本周重点趋势总结

1. Nanobody/VHH 研发热点

本周 10 篇纳入文献中 7 篇涉及 nanobody/VHH，覆盖了从结构生物学（NMR 表位工程化 + X 射线验证）、融合蛋白治疗（ADAMTS13-sdAb 双功能分子）、诊断（沙门氏菌 diVHH 免疫磁分离）、蛋白生产工具（nanobody 溶解性伙伴）到无细胞分泌平台（ProSecCO）的多个维度。特别值得注意的是 NMR 引导的 nanobody 筛选方法（PMID 42702812, Adv Sci），将 NMR 结构生物学与 AlphaFold2 预测结合，为膜蛋白 nanobody 开发提供了新的方法学范式。

2. Affibody 支架的新应用

本周 affibody 方向有 3 篇高质量文献，覆盖了三个不同应用场景：

• 诊疗一体化光热治疗（PMID 42569871, ACS Appl Bio Mater）：affibody 二聚体 + 20 个近红外染料位点偶联 → HER2 肿瘤完全消融
• 临床 PET 成像（PMID 42709070, Eur J Nucl Med Mol Imaging）：Affibody [⁶⁸Ga]Ga-ATH001 首次人体剂量学研究 → 纤维化成像
• 化学生物学工具（PMID 42686833, Nat Chem）：碘化 Phe 脱笼化学在 affibody 中实现 HER2 配体-受体动态调控

affibody 正在从纯粹的肿瘤靶向成像扩展到光热治疗、临床纤维化诊断和化学生物学方法学验证等新方向。

3. FN3 结构域的结构生物学

PMID 42696580（Sci Adv）报道了 ELFN 蛋白 FN3 结构域与 mGluR 的冷冻电镜结构，虽然这是天然 FN3 结构域的跨突触相互作用而非工程化 monobody/adnectin，但为 FN3 折叠的结合界面设计提供了结构参考。

4. 筛选与设计方法进展

• NMR 引导筛选 + AlphaFold2 预测（PMID 42702812）：膜蛋白表位工程化的新方法学
• 无细胞高通量筛选平台 ProSecCO（PMID 42685219）：300 个 Sec 变体单次筛选 + nanobody 分泌验证
• 遗传密码扩展 + 生物正交脱笼（PMID 42686833）：affibody 中位点特异性非天然氨基酸掺入

5. 诊断、成像、递送和治疗方向

• 诊断/成像：diVHH 免疫磁分离沙门氏菌检测（PMID 42709182）、Affibody PET 纤维化成像首次人体研究（PMID 42709070）、近红外荧光成像（PMID 42569871）
• 治疗：ADAMTS13-sdAb 融合双功能分子 iTTP 治疗（PMID 42705544）、affibody 光热治疗（PMID 42569871）、生物正交脱笼调控肿瘤免疫（PMID 42686833）
• CAR/细胞治疗：综述涵盖 Nb-CAR-T 在抗血管生成中的应用前景（PMID 42698711）

6. 值得后续追踪的靶点、作者、团队或技术路线

• 靶点：NaV1.7（疼痛/软骨疾病）、PDGFRβ（纤维化）、HER2（肿瘤光热/化学调控）、VWF A1（iTTP）
• 技术路线：NMR 引导 nanobody 筛选 + AlphaFold2 预测（Liu/Mobli 团队，Univ of Queensland + Monash）；无细胞 Sec 平台 + nanobody 分泌（Erb 团队，MPI）
• Affibody 临床转化：[⁶⁸Ga]Ga-ATH001 已进入首次人体研究（Eriksson 团队，Uppsala University），值得持续追踪后续临床数据

四、待核验或排除文献

待核验文献（2 篇）

排除文献（4 篇）

五、质量检查清单

1. ✅ 每篇文献均有 PMID
2. ✅ 题目与 PubMed 完全一致（原文英文题目直接复制自 PubMed XML）
3. ✅ 摘要来自 PubMed（EFetch API 获取，未改写、未编造）
4. ✅ 核验 JCR Q1/Q2 或 SCI 1/2 区（通过 ISSN/eISSN 在 2025 年高质量杂志参考目录中精确匹配）
5. ✅ 明确 OA 状态（PMC OA API 检查结果）
6. ✅ 明确支架类型（nanobody/VHH、FN3/monobody、affibody 等）
7. ✅ 排除了 antibody、Fab、scFv 为主线的文章（脚本过滤 + 人工复核排除 2 篇语义不符的 "protein scaffold" 文献）
8. ✅ 区分摘要解读和全文解读（所有文献均标注"未进行全文分析，原因：非 OA / 无法合法访问全文"）
9. ✅ 未编造任何信息（PMID、DOI、摘要、期刊分区均来自 PubMed API 和高质量杂志参考目录）

本报告由 PubMed E-utilities API 自动检索 + ISSN/eISSN 期刊分区核验 + 人工内容审核生成。检索日期：2026-09-09 | 覆盖时间：2026/09/03 - 2026/09/08期刊分区数据来自 2025 年高质量杂志参考目录（9128 条记录，Clarivate JCR 2024JIF）。